Cytotoxicity/proliferation detection
細胞毒性/增殖檢測
細胞增殖是生物體生長(cháng)、發(fā)育、繁育和遺傳的基礎，是生物體的重要生命特征。細胞通常以分裂的方式進(jìn)行增殖。
細胞毒性是由細胞或化學(xué)物質(zhì)引起的單純細胞殺傷事件，不依賴(lài)于凋亡或壞死的細胞死亡機理。
細胞增殖及毒性檢測是生物相容性測試的一種，通過(guò)檢測材料或者藥物對細胞的增殖或者生長(cháng)的影響，來(lái)評價(jià)藥物或材料的毒性或者活性，主要用于藥物活性篩選、細胞增殖測定、細胞毒性測定等。
細胞毒性/增殖檢測
MTT法:
MTT即噻唑藍，是一種可接受氫離子的黃色有機化合物，可以被活細胞線(xiàn)粒體內的琥珀酸脫氫酶和細胞色素C等還原為不能溶于水的藍紫色產(chǎn)物甲臜（formazan）。該產(chǎn)物雖然不溶于水，但可以溶于特定溶劑(如DMSO)。
實(shí)驗原理
在特定溶劑存在的情況下，該產(chǎn)物被完全溶解，然后通過(guò)酶標儀在特定波長(cháng)（如570nm）條件下根據吸光度來(lái)反映細胞增殖/毒性情況。
結果判讀
細胞增殖越多越快，則吸光度越高；細胞毒性越大，則吸光度越低。
CCK-8法:
使用的是WST-8(一種類(lèi)似于MTT的化合物)，它在電子耦合試劑的作用下可以被活細胞線(xiàn)粒體內的脫氫酶還原為高度水溶解的黃色甲臜（Formazan）
結果判讀
細胞增殖越多越快，則顏色越深；細胞毒性越大，則顏色越淺。對于同樣的細胞，顏色的深淺和細胞數目呈線(xiàn)性關(guān)系。
方法對比
| 比對類(lèi)別 | MTT | CCK-8 |
|---|---|---|
| 優(yōu)點(diǎn) | 靈敏度較高，價(jià)格便宜 | 1.操作簡(jiǎn)單，避免細胞計數過(guò)程中認為因素的影響； 2.CCK-8法的檢測靈敏度很高甚至可以測定較低細胞密度； 3.可反復用酶標儀讀板，檢測時(shí)間靈活，不影響細胞進(jìn)行后續實(shí)驗； 4.無(wú)需放射性同位素和有機溶劑，對細胞毒性低； 5.CCK-8產(chǎn)生的Formazan是水溶性的，無(wú)需換液。 |
| 缺點(diǎn) | 操作步驟較多，需要使用有機試劑，靈敏度不如CCK-8，多數需要配置，檢測時(shí)間長(cháng)，細胞毒性較高。 | 1.價(jià)格較MTT貴； 2.CCK8試劑的顏色為淡紅色，與含酚紅的培養基顏色接近，容易漏加或多加。 |
| 實(shí)驗用途 | 1.藥物(也包括其他處理方式如放射線(xiàn)照射)對體外培養的細胞毒性的測定； 2.細胞增殖及細胞活性測定。 |
1.細胞增殖測定：細胞增殖實(shí)驗在很多領(lǐng)域都會(huì )用到，比如腫瘤相關(guān)、損傷后修復等。 2.藥物篩選：在測定一個(gè)藥物的毒性和安全有效濃度時(shí)，經(jīng)常會(huì )用到CCK-8。 3.細胞毒性測定：這個(gè)可以和各個(gè)處理因素對細胞活性和增殖的影響，比如在UV、低氧或者什么化學(xué)物品對細胞的影響上。 4.腫瘤藥敏試驗：應用最為廣泛。 5.微生物對細胞的毒性或增殖的實(shí)驗。 |
服務(wù)價(jià)格
| 商品信息 | 貨號 | 單價(jià) | 備注 |
|---|---|---|---|
| CCK8檢測 | LLJ021 | 750元/板/時(shí)間 | 不含細胞株和受檢藥物。4個(gè)復孔（共60孔可以用，但要除去凋零組、對照組，即藥物最多可設置13組(52-54孔可用)） |
| MTT檢測 | LLJ022 | 650元/板/時(shí)間 | 不含細胞株和受檢藥物。4個(gè)復孔（共60孔可以用，但要除去凋零組、對照組，即藥物最多可設置13組(52-54孔可用)） |
實(shí)驗掠影
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